أستغفر الله العظيم ... سبحان الله وبحمده



العودة   منتديات داماس > المنتديات العامة > الطب البشري - العلاج بالأدوية و الأعشاب الطبية


مواضيع مميزة  


آخر عشرة مواضيع المواضيع النشطة


30-09-2011, 03:11 AM
the scientist غير متصل
عضو فعال
رقم العضوية: 388932
تاريخ التسجيل: Sep 2011
الإقامة: Alexandria
المشاركات: 64
إعجاب: 3
تلقى 6 إعجاب على 4 مشاركة
تلقى دعوات الى: 0 موضوع
    #1  

PCR & DNA


&
نقدم لكم في موضوعنا هذا شرح لمعني كلمة PCR
احيانا نري كثيرا كلمة تحليل PCR ولكن لانعرف ما هو PCR وفيم يستخدم وماهو تركيبه واستخداماته
والان نعرض لكم شرح مبسط لهذا الجهاز
Polymerase Chain Reaction
في البدايه يجب ان نعرف ما هو (DNA) ؟؟؟؟
اعتقد العلماء في بداية الامر ان البروتين هو الماده الوراثيه في جسم الانسان ولكنه اعتقاد خاطئ حيث اثبت بعد ذلك ان DNA هو الماده الوراثيه في جسم الانسان والذي اثبت ذلك هو كمية ال DNA في الخلايا حيث وجد أن كمية الDNA في جميع الخلايا الجسديه في جسم الانسان متساويه
وكمية ال DNA في الخلايا الجنسيه نصف كمية DNA الموجود في الخلايا الجسديه
أما البروتين فتختلف كميته في نفس الخلايا (اي نسبته غير متساويه)
لماذا سمي DNA بهذا الاسم وماتركيبه وشكله في الخلايا ؟؟؟؟؟
Deoxyribose Nucleic Acid
Deoxyribose: هو سكر خماسي (اي يحتوي علي 5 ذرات كربون) ويدخل في تركيب الDNA
Nucleic Acid: معناها الحمض النووي ويطلق عليه اسم (الحمض النووي DNA)
جزئ الDNA عباره عن شريطين ملتفين حول بعضهم
شكل جزئ ال DNA : أوضحت التجارب باستخدام أشعة X ان جزئ الDNA ملتف علي شكل حلزون او لولب (helix)



سؤال: كيف يرتبط شريطين الDNA ببعضهم ؟؟؟؟
كل شريط من شرائط الDNA يحنوي علي عدد من النيوكلوتيدات
النيوكلوتيدات: هي تعتبر الوحده الاساسيه والبنائيه لشريط ال DNA حيث ان شريط الDNA يتكون من عدد من النيوكلوتيدات مرتبطه ببعضها عن طريق رابطه تساهميه في وجود الفوسفات
هذا التركيب يوجد علي طول شريط الDNA ويخرج من جانب كل نيكلوتيده مايسمي بالقاعده النيتروجينيه وهي التي ترتبط بالقاعده النيتروجينيه المقابله لها علي الشريط الاخر عن طريق روابط هيدروجينيه
القواعد النيتروجينيه: هي اربع انواع (A,T,G,C)
القاعده A علي الشريط الاول ترتبط بالقاعده T فقط علي الشريط الاخر برابطه ثنائيه هيدروجينيه اما
القاعده C علي الشريط الاول ترتبط بالقاعده G علي الشريط الاخر برابطه ثلاثيه هيدروجينيه
عدد النيوكلوتيدات التي تحتوي علي القاعدهA مساوي لعدد النيوكلوتيدات التي تحتوي علي T
وعدد النيوكلوتيدات التي تحتوي علي القاعده C مساوي لعدد النيوكلوتيدات التي تحتوي علي G


سؤال: لماذا تم استخدام الرابطه الهيدروجينيه ولم يستخدم اي رابطه اخري ؟؟؟
لان الروابط الهيدروجينيه قويه ولاتتكسر الا في درجات الحراره العاليه والرابطه الثلاثيه اقوي من الثنائيه
بعد ان قمنا بشرح مبسط للDNA يمكننا الان معرفة ماهو الPCR
PCR ؟؟؟
تم اختراع الجهاز بواسطة الدكتور/ كاري موليس عام 1983 وحصل علي جائزة نوبل عام 1993 علي هذا الاختراع الرائع.
سؤال لماذا سمي باسم Polymerase Chain Reaction
Polymerase : لان الانزيم الذي يستخدم في هذا التفاعل (داخل الجهاز) يسمي DNA Polymerase
Chain : لان داخل هذا الجهاز تحدث عدة تفاعلات فان نواتج التفاعل الاول وجودها اساسي لحدوث التفاعل التالي ومن غير هذه النواتج لاتتم باقي العمليه داخل الجهاز
أهمية الجهاز: يستخدم هذا الجهاز لكي يضاعف الماده الوراثيه DNA لمعرفة الامراض التي تصيب الانسان ويصعب اكتشافها باستخدام اي تحليل اخر مثل:
- فيروس C
- مرض السرطان
- الامراض الوراثيه
- الطفره (دراسة التغير في الجينات او التغير في تركيب ال DNA نتيجة الاصابه بمرض)
- في اكتشاف تعاطي المخدرات او مواد كيميائيه معينه
- في الابحاث العلميه والهندسه الوراثيه
- واخيرا في اكتشاف مرض انفلونزا الخنازير H1N1
ماهي مكونات جهاز PCR وكيف يعمل ؟؟
اولا: تركيب يسمي PCR tube or eppendorf
وهو عباره عن انبوبه توضع فيها جميع المكونات المطلوبه قبل وضعها في الجهاز


في البدايه يتم وضع الماده الوراثيه DNA المراد فحصها ثم يتم اضافة انزيم DNA Polymerase ويسمي Themostable Taq polymerase لانه لايتأثر بالحراره
ثم يتم اضافة dNTPs (deoxynucleotide triphosphate)
ثم يتم اضافة Buffer solution هو محلول يعمل علي ظبط الحمضيه والقلويه لان لابد من وجود وسط مناسب لكي يعمل الانزيم
ثم يتم اضافة ال Primers
ثم يتم وضع PCR Tube داخل جهاز يسمي Thermocycler كمابالرسم


ماذا يحدث بعد تشغيل الجهاز ؟؟
كما نعلم ان الجهاز في البدايه يضاعف الماده الوراثيه (amplification of DNA)
- في البدايه يتم ظبط درجة الحراره داخل الجهاز علي 90 درجه سليزيوسيه
لكي يتم فصل شريطي الDNA عن طريق كسر الروابط الهيدروجينيه (سبق شرحه)
- بعد عملية الفصل يتم تغيير درجة الحراره الي 60 درجه سليزيوسيه حتي ترتبط Primers
ببداية كل شريط (تم فصل الشريطين في الخطوه الاولي )
- يتم تغيير درجة الحراره الي 72 درجه سليزيوسيه وهي مناسبه لعمل DNA Polymerase
ويتم تركيب dNTPs (نيوكلوتيدات) علي كل شريط تم فصله لنحصل في النهايه علي 2 جزئ DNA
كل جزئ يتكون من شريطين وهذه العمليه تتكرر كثيرا لنحصل علي اعداد كثيره جدا من جزيئات DNA
ونحصل في النهايه تقريبيا علي حوالي 2.097.152 نسخة من DNA


الحمد لله
اراكم ان شاء الله في موضوع اخر
واتمني ان يكون قد وفقني الله في شرح هذا الموضوع





 


PCR & DNA

English

Powered by vBulletin® Version
Copyright ©2000 - 2017, Jelsoft Enterprises Ltd.
The owner and operator of the site is not responsible for the availability of, or any content provided.
Topics that are written in the site reflect the opinion of the author.
جميع ما يُطرح من مواضيع ومشاركات تعبر عن رأي كاتبها ولا تعبر عن رأي مالك الموقع أو الإدارة بأي حال من الأحوال.